科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)对H_2O_2预处理PC12细胞的适应性细胞保护作用的影响。方法在PC12细胞建立H_2O_2预处理对抗高浓度H_2O_2损伤的实验模型。将PC12细胞分组如下:(1)对照组,不加任何药物处理;(2)单纯H_2O_2处理组,细胞给予高浓度H_2O_2(50μmol/L)作用24 h;(3)预处理组,10μmol/L H_2O_2作用PC12细胞90 min后撤去H_2O_2后继续常规培养24 h;(4)预处理+H_2O_2处理组,先用10μmol/L H_2O_2预处理,然后给予高浓度H_2O_2(50μmol/L)作用24 h;(5)预处理+H_2O_2处理+p38抑制组,10μmol/L H_2O_2预处理后,在给以高浓度H_2O_2(50μmol/L)作用24 h前20 min加入10μmol/L p38特异性抑制剂SB203580;(6)p38抑制组,细胞仅用10μmol/L SB203580作用24 h;(7)H_2O_2处理+p38抑制组,PC12细胞在给以高浓度H_2O_2(50μmol/L)作用24 h前20min加入10μmol/Lp38特异性抑制剂SB203580。应用碘化吡啶(PI)染色,流式细胞术测定细胞凋亡率,免疫印迹法测定p38磷酸化水平并进行各组比较。结果单纯H_2O_2处理组细胞凋亡率较对照组明显升高[(48.33±7.41)%比(3.26±0.31)%,P<0.01]。SB203580能显著抑制50μmol/L H_2O_2的致细胞凋亡作用,使细胞凋亡率降低[(23.42±3.52)%比(48.33±7.41)%,P<0.01]。预处理+H_2O_2处理组细胞凋亡率较单纯H_2O_2处理组明显下降[(16.93±3.50)%比(48.33±7.41)%,P<0.01]。SB203580不影响H_2O_2预处理的适应性细胞保护作用。50μmol/L H_2O_2具有比H_2O_2预处理更强的激活p38的作用,H_2O_2预处理能明显地抑制50μmol/LH_2O_2对p38的激活作用。结论H_2O_2预处理抑制高浓度H_2O_2对p38的激活可能是其适应性细胞保护机制之一。
- 单位
