干扰MAD2L1基因表达对乳腺癌细胞凋亡的影响及机制

作者：封海岗; 刘国文^*; 曹洪

来源：山东大学学报(医学版), 2022, 60(10): 9-16.

DOI：10.6040/j.issn.1671-7554.0.2022.0282

• 乳腺癌
• 有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1
• 细胞凋亡
• p38MAPK信号通路

目的 探讨干扰有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1(MAD2L1)基因表达对乳腺癌(BC)细胞凋亡的影响及其机制。方法 采用qRT-PCR检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A和4种BC细胞系(MDA-MB-231、MCF-7、SK-BR-3和BT-20)中MAD2L1 mRNA表达水平。将MAD2L1 siRNA转染至MDA-MB-231细胞中，qRT-PCR和Western blotting检测细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平；MTT检测细胞增殖能力；流式细胞术法检测细胞凋亡率；Western blotting检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK(Thr180/Thr182)和p38MAPK等蛋白表达水平。采用p38MAPK抑制剂SB203580联合处理上述细胞，Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率的变化；Western blotting检测Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK和p38MAPK表达水平的变化。结果 BC细胞系中MAD2L1 mRNA表达水平高于MCF-10A细胞，其中MDA-MB-231细胞最为显著。干扰MAD2L1基因可降低MDA-MB-231细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平(tmRNA=10.51,PmRNA<0.001;t蛋白=18.30,P蛋白<0.001),同时抑制细胞增殖(F组别=243.36、F时间=44.00、F组别×时间=9.881,P均<0.001),促进细胞凋亡(t=9.10,P<0.001),并上调Bax、cleaved-caspase-3和p-p38MAPK蛋白表达水平(tBax=15.05,PBax<0.001;tcleaved-caspase-3=5.26,Pcleaved-caspase-3=0.006;tp-p38MAPK=28.46,Pp-p38MAPK<0.001),下调Bcl-2蛋白表达水平(tBcl-2=14.23,P<0.001)。然而，SB203580处理可抑制MAD2L1基因干扰对MDA-MB-231细胞凋亡的诱导作用(P=0.002)。结论 干扰MAD2L1基因表达可抑制MDA-MB-231细胞增殖，并诱导其凋亡，其作用机制可能与激活p38MAPK信号通路有关。

• 单位
  南华大学; 深圳市第二人民医院