褪黑素调控MEG3/miR-223/NLRP3轴对流感病毒感染小鼠模型肺损伤的影响

作者：靳莉; 徐超; 张华; 李振华

来源：中国免疫学杂志, 2023, 39(12): 2528-2533.

• 褪黑素
• 母体表达基因3/微小RNA-223/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3轴
• 流感病毒感染
• 肺损伤

目的：探究褪黑素（MT）调控母体表达基因3(MEG3)/微小RNA-223(miR-223)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴对流感病毒感染小鼠模型肺损伤的保护情况。方法：50只小鼠按随机数字法分为对照组、模型组、MT低、中、高剂量组，每组10只。除对照组外，其余各组以5×105 EID50剂量给予H7N9病毒悬浮液滴鼻，对照组给予等体积磷酸缓冲液滴鼻。造模后当天MT低、中、高剂量组分别腹腔注射15、30、60 mg/kg MT，对照组、模型组腹腔注射等体积生理盐水。末次给药24 h处死小鼠进行实验。所有小鼠检测肺指数；苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织形态；ELISA检测肺组织中IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α、IFN-β水平；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小鼠肺组织中MEG3 mRNA、miR-223水平；蛋白免疫印迹检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)、pro-caspase-1蛋白水平。生物信息学预测和双荧光素酶实验检测MEG3与miR-223、miR-223与NLRP3的靶向关系。结果：病理结果显示模型组小鼠肺组织肺泡壁充血明显、腔内出现明显的炎症渗出及炎症细胞浸润明显；MT（低、中、高）剂量组随着MT剂量的升高，小鼠肺组织肺泡壁充血现象、腔内炎症渗出及炎症细胞浸润现象均得到改善。与对照组相比，模型组肺指数、肺组织中趋化因子、炎症因子、抗病毒因子、MEG3水平，NLRP3通路蛋白水平升高（P<0.05）,miR-223水平降低（P<0.05）；添加MT后抗病毒因子升高明显，其余指标均有所改善。miR-223与MEG3、NLRP3均存在靶向调控关系。结论：MT能够缓解H7N9流感病毒感染小鼠的肺损伤，可能与调控MEG3/miR-223/NLRP3轴缓解炎症有关。

• 单位
  郑州大学