程序性细胞死亡因子4增强三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞生长及核因子κ B信号通路的抑制作用

作者：刘慧娟; 李桂玲; 雷平冲^*

来源：中华肿瘤杂志, 2019, 41(09).

• 神经母细胞瘤
• 程序性细胞死亡因子4
• 核转录因子κB
• 信号通路

目的探讨程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对三氧化二砷(As2O3)诱导的神经母细胞瘤细胞生长和核因子κB(NF-κB)信号通路的抑制作用。方法在神经母细胞瘤细胞中转染PDCD4过表达载体, 以荧光定量PCR和Western blot方法测定过表达效果。将神经母细胞瘤细胞分为对照组、PDCD4组、As2O3组和As2O3+PDCD4组, 以四甲基偶氮唑蓝法测定细胞的增殖能力, 克隆形成实验测定细胞克隆形成能力, 流式细胞术测定细胞凋亡变化, Western blot法测定细胞中NF-κB p65和激活型caspase-3(cleaved caspase-3)蛋白的表达水平。结果 PDCD4过表达载体转染可以明显提高神经母细胞瘤细胞中PDCD4的表达水平。对照组、PDCD4组、As2O3组和As2O3+PDCD4组细胞的存活率分别为100%、(72.14±5.20)%、(62.58±3.14)%和(40.87±2.47)%, 克隆形成率分别为(91.25±8.36)%、(65.32±7.14)%、(57.23±5.28)%和(37.14±3.64)%, 凋亡率分别为(3.57±0.24)%、(28.64±3.20)%、(36.41±4.58)%和(49.65±5.27)%。与对照组比较, PDCD4组、As2O3组和As2O3+PDCD4组细胞的存活率、克隆形成率均明显降低(均P<0.05), 凋亡率明显升高(均P<0.05), As2O3+PDCD4组较PDCD4组和As2O3组变化更为显著(均P<0.05)。对照组、PDCD4组、As2O3组和As2O3+PDCD4组cleaved caspase-3蛋白的表达水平分别为0.21±0.03、0.30±0.02、0.43±0.05和0.57±0.06, NF-κB p65蛋白的表达水平分别为0.68±0.04、0.52±0.03、0.43±0.04和0.32±0.02。与对照组比较, PDCD4组、As2O3组和As2O3+PDCD4组细胞中NF-κB p65蛋白的表达水平均明显降低(均P<0.05), cleaved caspase-3蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05), As2O3+PDCD4组较PDCD4组和As2O3组变化更为显著(均P<0.05)。结论 PDCD4可增强As2O3对神经母细胞瘤细胞生长和NF-κB信号通路的抑制作用。

• 单位
  河南省人民医院