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摘要
本发明公开一种重组蓝铜肽前体-寡肽的高纯度制备方法,涉及基因工程领域。该制备方法利用大肠杆菌合成重组多拷贝GHK串联短肽,及酶解法切割释放GHK单体以大量生产GHK单肽。该方法的关键在于(1)利用class-IIS型限制性核酸内切酶在识别位点下游特定位置切割任意DNA序列的特点,实现短肽的多次串联延长；解决了基因工程表达短肽的低表达量的问题,具有降低生产成本、减轻化学合成中造成的环境负担的优势；(2)无需蛋白纯化柱,简单通过硫酸铵沉淀-等电点沉淀结合的蛋白纯化方法,即可高效分离纯化酶切获得GHK单体；与GHK标准品具有相同的生物活性,且纯度高、成本低。
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