人羊膜载体培养骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化的研究

作者：王晶; 苏冠方; 李海波; 徐春玲

来源：眼科新进展, 2009, 29(05): 325-329.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2009.05.002

• 人羊膜
• 骨髓基质干细胞
• 分化
• 神经元
• 三维培养

目的探索人羊膜(human amniotic membrane,HAM)基质负载大鼠骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)、乳鼠视网膜细胞诱导条件下分化为神经元样细胞及体外构建三维培养体系的可行性。方法中性蛋白酶消化去除HAM上皮细胞,保留基底膜作为载体,种植大鼠BMSCs,以乳鼠视网膜细胞作为诱导剂,采用Transwell双层共培养的方法诱导种植在HAM基质上的BMSCs,并进行形态学、组织学、超微结构观察。结果倒置显微镜下观察BMSCs接种到HAM基质上后能很快贴附生长,且细胞活力好、折光性强。乳鼠视网膜细胞诱导条件下,电镜观察诱导后的第3天细胞形态开始变化,可见小的突起。第5天细胞形态进一步变化,出现神经元样细胞的形态,突起末端相互间连接呈网状。经免疫组织化学法鉴定nestin、神经丝蛋白表达呈阳性,证明其具有神经元细胞的特征。结论HAM基质负载的大鼠BMSCs可被定向诱导分化为神经元样细胞,体外构建三维培养体系是可行的。通过上述研究证实应用HAM基质负载并诱导BMSCs向目的细胞分化是可能的。

• 单位
  吉林大学第二医院; 吉林大学第一医院