螺旋藻中分析级藻蓝蛋白的高效制备

作者：关瑞; 王玉; 曹雷鹏^*; 李聪苗; 黄正花; 冯硕儒; 周悦; 樊瑞娟; 刘玉环

来源：南昌大学学报(理科版), 2023, 47(02): 157-164.

DOI：10.13764/j.cnki.ncdl.2023.02.009

• 螺旋藻
• 藻蓝蛋白
• 高压均质
• 超声
• 分离纯化

为了低成本高效生产分析级藻蓝蛋白(C-Phycocyanin, C-PC),本文以钝顶螺旋藻藻粉为原料，采用超声耦合高压均质高效提取藻蓝蛋白，通过盐析、透析和葡聚糖凝胶柱G-75纯化所提取的藻蓝蛋白，从而使得藻蓝蛋白的纯度达到分析级，同时利用SDS-PAGE和紫外吸光度分析纯化提物中的成分变化。实验结果表明，高压均质耦合超声法可有效提高藻蓝蛋白的产率，其最佳组合提取条件为：390 W超声2 min,超声2 s/间隔2 s, 60 MPa处理3次，其粗提液中藻蓝蛋白产率和纯度(A620/A280)分别为131.2 mg·g-1和0.69,比单独高压均质和超声的产率分别提高了51.07%和58.15%,且高于先前报道的。粗提液经过两步铵盐析(12%硫酸铵和50%硫酸铵)和透析，藻蓝蛋白纯度可提升至1.09(>0.7),最后经过25 min葡聚糖凝胶G-75层析纯化得藻蓝蛋白产率和纯度(A620/A280)分别为107.65 mg·g-1和4.23(>4.0),达到分析级标准，其回收率达到82.05%,此外，分析级藻蓝蛋白的色度L*a*b*值分别为58.07,-15.44,-17.86,其主要与纯度、浓度及原料来源有关。采用SDS-PAGE凝胶电泳图分析藻蓝蛋白的分子量(17 kDa)及纯化效果，与先前报道的藻蓝蛋白分子量(15～21 kDa)基本一致。该研究结果为低成本高效生产分析级藻蓝蛋白提供技术支撑。

• 单位
  南昌大学; 生物质转化教育部工程研究中心