猪多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素的毒力及免疫原性研究

作者：何海; 郝成武; 张飞; 候凤; 张艳盟; 贺笋^*

来源：中国预防兽医学报, 2021, 43(12): 1306-1311.

• 多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素
• 纯化
• 毒力
• 免疫原性

为研究致猪萎缩性鼻炎的主要病原体—多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素（PMT）的毒力及免疫原性，本研究从A型多杀性巴氏杆菌中提取、纯化该毒素后获得粗提的PMT，含量约为3 200μg/mL，纯度约2.2%；经纯化后纯度可达90%以上；将不同剂量的PMT感染小鼠，测定其半数致死量（MLD50），同时将不同剂量PMT感染仔猪，测定其致仔猪鼻甲骨萎缩的最小感染剂量。结果显示，纯化PMT对小鼠的MLD50为0.5μg/kg，对仔猪致鼻甲骨萎缩的最小感染剂量为0.15μg/kg。纯化PMT经甲醛灭活并加入氢氧化铝佐剂后制备类毒素疫苗，分别免疫小鼠和仔猪并测定其免疫原性；对免疫后的小鼠和仔猪攻毒，观察记录小鼠死亡情况与仔猪鼻甲骨萎缩程度，测定纯化PMT类毒素疫苗的保护效果。结果显示，采用纯化PMT免疫小鼠与仔猪，首免后28 d，血清经试剂盒检测抗体阳性率均达到100%；首免后28 d对小鼠攻毒，攻毒后7 d纯化PMT对小鼠提供的免疫保护率达到100%(10/10)；首免后28 d对仔猪攻毒，攻毒后28 d纯化PMT对仔猪提供的免疫保护率达到100%(5/5)。本研究提取并纯化了PMT，虽然毒力较强但具有较好的免疫原性，为PMT的提取、纯化及制备灭活类毒素疫苗提供了实验依据。