摘要
目的研究负压封闭引流(vacuum sealing drainage, VSD)技术干预下局部氧分压(oxygen partial pressure, PtO2)的变化,并探讨VSD减轻兔骨骼肌缺血-再灌注损伤(ischemia reperfusioninjury, I/R)的可能机制。方法于同济医院急诊创伤外科实验室,将30只新西兰兔随机(随机数字法)分成对照(假手术)组、I/R组和I/R+VSD组,每组10只。通过阻断左后肢股动静脉(4 h)和恢复再灌注(6 h)的方法建立兔I/R模型,根据远端是否存在动脉搏动作为判断建模成功的标准。在此基础上使用VSD技术进行再灌注时的干预,分别于建模前、再灌注前、再灌注后3 h或实验结束后等数个时间点,在损伤肌肉区域测量、取样及耳缘静脉抽血,对各组PtO2、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α) mRNA和蛋白、以及乳酸(lactic acid, LA)的含量进行检测。所得数据采用方差分析、LSD-t法或Tamhane’sT2法进行统计学分析。.结果(1) PtO2:建模后,I/R组和I/R+VSD组Pt02均下降,但两组间差异无统计学意义(t=1.322,P=0.296);恢复再灌注后两组PtO2显著上升,但仍低于对照组(F=8.334, P=0.006),且在此期间I/R+VSD组持续低于I/R组直至实验结束(t=2.015,P=0.046);(2) HIF-1αmRNA:与对照组比较,I/R组和I/R+VSD组HIF-1αmRNA在建模后2h和4h时均显著升高(F=10.120,P=0.002和F=36.480, P<0.01);恢复再灌注后,I/R组和I/R+VSD组虽较前降低,但仍高于对照组(F=6.960,P=0.015和F=4.470,P=0.035);且I/R+VSD组显著高于I/R组(t=1.799, P=0.048和t=5.911,P=0.019);(3) HIF-1α蛋白:与对照组比较,I/R组HIF-1α蛋白表达在再灌注前和再灌注后3 h显著升高(t=15.567,P<0.01和t=2.768,P=0.031); I/R+VSD组HIF-1α蛋白表达在再灌注前、再灌注后3 h和6 h均显著升高(t=13.438,P<0.01; t=7.854,P=0.009; t=6.442,P=0.011);且I/R+VSD组在再灌注后均高于I/R组(t=1.878,P=0.046和t=2.609,P=0.030);(4) LA:与对照组比较,I/R组和I/R+VSD组外周静脉血和骨骼肌中LA的含量在实验结束后均显著升高(F=9.540,P=0.002和F=13.750, P<0.01),且I/R+VSD组均显著低于I/R组(t=2.263,P=0.040和t=3.617,P=0.027)。结论VSD技术可通过降低局部PtO2,上调HIF-1αmRNA的表达和减少HIF-1α蛋白的降解,使HIF-1α蛋白积聚和合成增加,并可能通过改善组织无氧代谢,减轻乳酸堆积,对兔骨骼肌的缺血-再灌注损伤起到保护作用。
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