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摘要
该研究旨在探索随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)分子标记技术在肠球菌种间快速分型的效果。试验通过筛选模板、单引物、双引物及RAPD反应体系，构建肠球菌种间分型体系，对32株已知肠球菌分型确定分型相似度标准，并通过对46株未知肠球菌进行种间分型以及管家基因rpo A测定验证分型效果。结果显示微波法提取基因组DNA满足实验需要，筛选出7条单引物用于双引物配对组合，最适的双引物反应体系为：2×PCR Taq Mix 12.5μL，模板DNA 1μL，引物各1μL,ddH2O 9.5μL；分型效果最好的双引物组合为Primer1+Primer5，该引物组合可以在80%的相似度下区分肠球菌种间差异，Primer1+Primer3组合在500 bp位置扩增出海氏肠球菌的特征条带，可以作为海氏肠球菌的鉴定指标，用以快速鉴定海氏肠球菌。
- 单位
