基于可视化环介导等温扩增技术快速检测中药材蜈蚣真伪

作者:胡超逸; 邓犇; 张景景; 范荫荫; 管瑶; 张凯; 刘义飞; 胡志刚*; 森林*
来源:世界科学技术-中医药现代化, 2022, 24(04): 1459-1465.

摘要

目的 建立少棘巨蜈蚣的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的方法,以实现对市场蜈蚣药材真伪的快速检测。方法 针对少棘巨蜈蚣COI序列设计专属性LAMP引物;考察恒温条件下最佳反应时间;通过对DNA模板的梯度稀释,确定LAMP反应对蜈蚣药材的最低检测浓度;对少棘巨蜈蚣及其伪品进行LAMP扩增反应,以考察LAMP引物对少棘巨蜈蚣的特异性。结果 筛选得到了一套特异性较好可用于检测少棘巨蜈蚣的LAMP引物,LAMP反应最佳反应时间为30 min,皮克级别的DNA就能被显著检出。结论 LAMP反应对于少棘巨蜈蚣的检测显示了良好的特异性,使用简便,有用于指导市场流通过程中蜈蚣药材的快速检测的潜力。