阴阳攻积丸含药血清抑制HepG2细胞增殖、侵袭及促进其凋亡的作用

作者：李永伟^*; 谢和平; 陈鸿杰; 李跃; 陈燕; 李义伟; 李玉洁; 向旭

来源：中国实验方剂学杂志, 2019, 25(02): 28-34.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20182420

• 阴阳攻积丸
• 原发性肝癌
• HepG2细胞
• 上皮-间质转换

目的:探讨阴阳攻积丸(Yingyang Gongji Wan,YYGJ)对肝癌细胞株HepG2的体外作用,为临床应用提供依据。方法:制备YYGJ大鼠含药血清;四唑化合物(MTS)比色法检测YYGJ含药血清组和空白组抑制率;原位末端凋亡法(TUNEL)检测空白组,YYGJ含药血清和5-氟尿嘧啶(5-FU)组凋亡;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HepG2细胞上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和Smad4 mRNA和蛋白表达;细胞迁移分析(transwell)检测HepG2细胞侵袭能力。结果:YYGJ含药血清呈浓度时间依赖性抑制HepG2细胞增殖,与空白组比较,第3天YYGJ 5%,10%,20%含药血清抑制率均明显升高(P <0. 05); YYGJ含药血清组凋亡率显著升高(P <0. 05),YYGJ 50%含药血清组凋亡率与5-FU组比较差异不显著。与空白组比较,YYGJ含药血清组E-cadherin,Smad4 mRNA和蛋白表达均明显升高,Vimentin,MMP-2 mRNA和蛋白均明显降低(P <0. 05),与5-FU作用一致;与空白组比较,YYGJ含药血清组HepG2细胞侵袭能力明显降低(P <0. 05),其中YYGJ 50%含药血清组与5-FU组细胞侵袭数目无显著差异。结论:阴阳攻积丸含药血清可抑制HepG2细胞增殖,诱导细胞凋亡,调节肿瘤细胞上皮间质转换(EMT)相关的E-cadherin,Vimentin,MMP-2,Smad4 mRNA和蛋白表达,并降低肿瘤侵袭能力,与化疗药物5-FU作用特点类似。该方可作为治疗肝癌寒湿证型的代表方,应深入研究其抗癌机制。

• 单位
  中山大学附属第三医院