环介导等温扩增联合核酸层析试纸快速鉴定燕窝基原

作者：吴茂勇; 廖沣; 麦泳诗; 赖小平; 吴依娜^*; 李耿

来源：中药材, 2018, 41(08): 1837-1841.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2018.08.013

• 燕窝
• 环介导等温扩增
• 核酸层析试纸
• 快速鉴定

目的:应用环介导等温扩增技术(LAMP)联合核酸层析试纸(LFD),基于燕窝中残留的线粒体DNA(mtDNA)建立燕窝基原的鉴定方法。方法:以不同生物基原的燕窝样品及伪品为研究对象,提取mtDNA,设计LAMP引物,建立LAMP扩增方法,并评价LAMP扩增浊度法检测与恒温水浴LAMP扩增联合LFD检测方法的特异性及灵敏度。结果:当反应温度为63℃时,燕窝线粒体中的细胞色素基因(mtDNA-cytb)的扩增效果最佳,而且LAMP扩增浊度检测与恒温水浴LAMP扩增联合LFD检测表现出一致的结果,均能有效区分燕窝样品的基原及伪品;在4.32×108～4.32×103 copies/μL的质粒标准品中具有良好的扩增检测效果。结论:LAMP扩增联合LFD的检测方法可以检测出燕窝核酸成分,对燕窝的基原鉴定具有良好的特异性和灵敏度,用于燕窝的检测快速准确,灵敏简便。

• 单位
  东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院; 广州中医药大学