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摘要
目的:研究NPM基因与染色体不稳定性(CIN)、细胞增殖及p53的关系,为阐明恶性血液病发生的分子机制提供参考。方法:采用软琼脂克隆形成法、常规染色体分析和G显带法检测人淋巴母细胞TK6(wtp53)、WTK1(mtp53)和正常人淋巴细胞永生化细胞(HNILL)的细胞增殖、染色体数量变化和5号染色体质量排,并观察Olomoucine对其的影响;用Sanger测序法和Western Blot方法分别测定NPM第12外显子的DNA序列、NPM蛋白和磷酸化蛋白的表达。结果:WTK1细胞的克隆形成能力和多倍体率均显著高于TK6细胞,同时WTK1细胞的NPM蛋白和磷酸化蛋白表达亦明显高于TK6细胞,且它们均又显著高于HNILL细胞;3株细胞均未发现5号染色体的重排和NPM第12外显子编码区的突变。用Olomoucine抑制NPM蛋白磷酸化后WTK1细胞的多倍体率明显降低。结论:WTK1、TK6和HNILL细胞的增殖能力、CIN与NPM蛋白和磷酸化蛋白表达呈正相关,而且与p53状态密切相关。
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单位复旦大学; 上海长海医院
