稳定表达hSPRY/Luc的人膀胱癌细胞株裸鼠皮下移植瘤模型的建立

作者：殷小涛; 李方龙; 金一鹏; 殷朝阳; 齐思勇; 武帅; 王籽橙; 王琳; 于继云; 高江平

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2017, 33(03): 337-341.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008074

• 膀胱癌
• 萤光素酶
• 人SPRY2基因
• 活体成像

目的建立稳定共表达人sprouty2(hSPRY2)基因和萤光素酶报告基因(luciferase,Luc)的J82人膀胱癌细胞株,并建立其裸鼠皮下移植瘤模型。方法通过PCR扩增hSPRY2及Luc全长基因,并分别构建慢病毒表达载体pCDH-hSPRY2和pLVX-Luc,包装慢病毒。用两种病毒上清同时感染人膀胱癌J82细胞,经嘌呤霉素、G418筛选出单克隆细胞株;采用细胞活体成像、免疫荧光细胞化学染色、Western blot法检测hSPRY2和Luc基因在单克隆细胞株中的表达。J82-hSPRY2/Luc细胞皮下接种BALB/c裸鼠建立移植瘤模型,通过活体成像检测肿瘤生长情况。结果筛选出J82-hSPRY2/Luc人膀胱癌细胞株,并通过活体成像、免疫荧光染色和Western blot验证了hSPRY2和Luc基因的共表达;通过活体成像动态观察到裸鼠皮下移植瘤的生长情况。结论成功建立了稳定共表达hSPRY2和Luc基因的J82-hSPRY2/Luc人膀胱癌细胞株以及可用于活体成像检测的裸鼠皮下移植瘤模型。

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所; 解放军总医院; 中国人民解放军白求恩国际和平医院