A型产气荚膜梭菌α毒素His-68基因的定点突变与结构分析

作者：许崇波; 樛跃; 许崇利; 高凤山; 窦永喜; 才学鹏

来源：中国兽医科学, 2010, (08): 811-816.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.08.008

• 产气荚膜梭菌
• α毒素基因
• 定点突变
• 表达 Clostridium perfringens
• alpha-toxin gene
• site-directed mutagenesis
• expression

利用定点突变技术,将A型产气荚膜梭菌α毒素(CPA)第68位组氨酸(CAT)定点突变成甘氨酸(GGT),构建了含CPA突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)。经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pMCPA-H68G含有CPA-His68Gly突变基因,且基因序列和阅读框架正确。重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)表达产物经SDS-PAGE分析,其表达量占菌体总蛋白相对含量的31.65%。应用EXPASY服务器上的SOPMA法对CPA和CPA-His68Gly突变体分子进行二级结构的预测,同时模拟了其三级结构。结果显示,CPA和CPA-His68G...

• 单位
  吉林化工学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 生物工程学院; 大连大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室