重复磁刺激对体外培养大鼠神经干细胞分化和凋亡的影响

作者：柳华; 韩肖华; 陈红; 黄晓琳

来源：中华物理医学与康复杂志, 2016, 38(01): 13-18.

• 重复磁刺激
• 神经干细胞
• 凋亡
• 分化

目的探讨重复磁刺激(rMS)对体外培养大鼠神经干细胞(NSCs)分化和凋亡作用的影响。方法选取新生3 d内的SD大鼠乳鼠双侧海马组织悬浮培养NSCs。,在分化培养基下,将NSCs单细胞悬液进行贴壁诱导分化后,分为空白对照组和rMS组。空白对照组为自然分化无特殊处理,rMS组刺激参数为频率10 Hz、50%最大输出强度、每日1000个脉冲、共刺激7 d。rMS组最后1次干预后1 h内收集2组细胞进行免疫荧光染色分析分化神经元的比例,采用免疫印迹法(Western blotting)检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白3(β-Ⅲtubulin)以及脑源性神经营养因子(BDNF)的表达量。再将分化7 d、无rMS干预的NSCs诱导凋亡,分为诱导凋亡组和诱导凋亡rMS组。诱导凋亡rMS组在诱导凋亡1 h后进行rMS干预,刺激参数同上,诱导4 h后收集细胞,通过流式细胞仪检测早期和晚期凋亡率,采用Western blotting检测凋亡相关蛋白(Caspase-3,Bcl-2,Bax)的表达量。结果 rMS干预7 d后NSCs分化为神经元的比例无显著性变化(P>0.05),β-Ⅲtubulin、GFAP、BDNF相对表达量无显著性变化(P>0.05)。诱导凋亡rMS组的细胞凋亡率(9.14±4.72)%与诱导凋亡组的细胞凋亡率(15.38±4.55)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。诱导凋亡rMS组的Caspase-3、Bcl-2、Bax相对蛋白表达量与诱导凋亡组比较,差异均有统计学意义(.P<0.05)。结论频率10 Hz、干预7 d的rMS对体外培养大鼠NSCs的分化无显著影响,但能减少诱导凋亡剂下神经细胞的凋亡,对神经细胞具有保护作用。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院