连翘脂苷A通过miR-502-3p/CDCA5通路调控结肠癌细胞HCT 116增殖、迁移和侵袭的分子机制研究

作者：卞雪春; 杨赛; 廖若夷^*

来源：临床和实验医学杂志, 2023, 22(20): 2129-2134.

• 结肠肿瘤
• 微RNAs
• 连翘脂苷A
• miR-502-3p
• CDCA5
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的 探讨连翘脂苷A是否通过微小RNA-502-3p(miR-502-3p)/细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)通路调控结肠癌细胞HCT 116增殖、迁移和侵袭。方法 将对数期的HCT 116细胞用80、160、320 mg/L连翘脂苷A处理，分别记为低剂量组、中剂量组、高剂量组，同时将未处理的细胞设为对照(NC)组。将正常人正常结肠上皮NCM460细胞用320 mg/L连翘脂苷A处理，计为NCM460高剂量组，将未处理的细胞设为对照，计为NCM460组。48 h后收集HCT 116细胞、进行增殖、迁移、侵袭、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、CDCA5蛋白表达和miR-502-3p表达测定，收集NCM460细胞进行增殖、迁移、侵袭测定。根据转染靶标将HCT 116细胞分为NC组(未行转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-CDCA5组(转染si-CDCA5)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-502-3p组(转染miR-502-3p)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-502-3p组(转染anti-miR-502-3p)、anti-miR-NC+高剂量组(转染anti-miR-NC+320 mg/L连翘脂苷A)、anti-miR-502-3p+高剂量组(转染anti-miR-502-3p+320 mg/L连翘脂苷A),检测HCT 116细胞的增殖、迁移和侵袭。双荧光素酶活性检测分析miR-502-3p与CDCA5的靶向结合。结果 低、中、高剂量连翘脂苷A作用后结肠癌HCT 116细胞的增殖能力、细胞迁移数量、细胞侵袭数量、MMP2、MMP9、CDCA5蛋白表达量均逐渐降低，miR-502-3p表达量逐渐升高，呈剂量依赖性，差异均有统计学意义(P<0.05)。NCM460组与NCM460高剂量组的NCM460细胞增殖、迁移及侵袭数量比较，差异无统计学意义(P>0.05)。CDCA5低表达或miR-502-3p高表达可减弱HCT 116细胞MMP2及MMP9蛋白表达、细胞增殖、迁移及侵袭能力，差异均有统计学意义(P<0.05),而miR-502-3p低表达的结果相反。miR-502-3p靶向调控CDCA5的表达。连翘脂苷A抑制HCT 116细胞CDCA5、MMP2、MMP9蛋白表达、增殖能力、细胞迁移和细胞侵袭的作用被miR-502-3p低表达所逆转。结论 连翘脂苷A通过上调miR-502-3p靶向调控CDCA5的表达，抑制结肠癌细胞HCT 116细胞的增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院