微小RNA-151a-3p靶向调控Tp53及对胰腺癌细胞侵袭、迁移的影响

作者：张晓红; 崔佳; 刘钇彤; 秦为娜; 高艳丽^*

来源：临床肿瘤学杂志, 2020, 25(07): 584-590.

• 胰腺癌
• 微小RNA-151a-3p(miR-151a-3p)
• 侵袭
• 迁移
• Tp53
• JAK2/STAT3

目的探讨微小RNA-151a-3p(miR-151a-3p)对肿瘤蛋白p53(Tp53)的靶向调控作用及对胰腺癌细胞侵袭和迁移的影响。方法采用实时定量PCR(q PCR)检测人胰腺癌细胞PANC-1和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7的miR-151a-3p水平,脂质体法向PANC-1细胞瞬时转染miR-151a-3p抑制物(Inhibitor组)或阴性对照序列(NC组),并设未转染的细胞为对照组。CCK-8法、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数以评估增殖、迁移和侵袭能力,q PCR和Western blotting检测磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT) 3、磷酸化Janus激酶(p-JAK) 2、基质金属蛋白酶(MMP)-9和Tp53水平,在线预测miR-151a-3p与靶基因Tp53的潜在结合序列并利用双荧光素酶报告基因实验和Western blotting验证两者的靶向关系。结果 PANC-1细胞的miR-151a-3p水平高于HPDE6-C7细胞(P<0.05)。Inhibitor组转染后的miR-151a-3p水平及增殖活力低于对照组和NC组(P<0.05); Inhibitor组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(30.902±2.282)%和(143.688±17.461)个,低于对照组的(81.160±5.271)%和(312.976±36.120)个及NC组的(82.315±4.334)%和(295.144±31.864)个(P<0.05);与对照组和NC组相比,Inhibitor组的Tp53水平升高,而MMP-9、p-STAT3和p-JAK2水平降低(P<0.05);与转染NC的细胞相比,当野生型质粒与miR-151a-3p模拟物共转染后,荧光素酶活性降低(P<0.05);而突变型质粒与miR-151a-3p模拟物共转染时,荧光素酶活性无显著改变(P>0.05)。结论 miR-151a-3p在胰腺癌中表达升高,下调其水平可抑制增殖、迁移和侵袭,可能通过负向靶向Tp53和调节JAK2/STAT3通路相关活性来发挥促癌因子的作用。

• 单位
  郑州人民医院; 邢台医学高等专科学校