H9N2亚型禽流感病毒NS1A融合基因的克隆表达及抗体的制备

作者：王坤; 张玉静; 孙兆增; 颜瑞清; 张蕾

来源：吉林农业大学学报, 2007, 29(3): 318-321.

DOI：10.3969/j.issn.1000-5684.2007.03.021

• 禽流感病毒
• NS1A融合基因
• 克隆
• 原核表达

应用重叠PCR的方法获得NS1A融合基因片段,并将融合基因片段成功地插入pET-20b原核表达载体,将阳性重组质粒转化表达受体菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达.进行表达产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting检测,结果表明NS1A融合基因获得高效表达,薄层扫描分析表明表达蛋白占菌体蛋白的15%.大量培养NSIA工程菌,用侧带法纯化蛋白后对日本大耳白兔进行常规免疫,应用间接ELISA测定抗体的效价达1:25 600,为下一步NS1A融合基因真核表达产物的检测奠定基础.

• 单位
  吉林大学