甲氨蝶呤对人牙髓间充质干细胞生物学特性的影响

作者：汤颖; 朱琦; 顾永春; 沈忆芬; 冯兴梅

来源：牙体牙髓牙周病学杂志, 2017, 27(02): 68-74.

DOI：10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2017.02.002

• 甲氨蝶呤
• 牙髓间充质干细胞
• 细胞增殖
• 成骨分化

目的:探讨不同浓度甲氨蝶呤(MTX)对人牙髓间充质干细胞(h DPSCs)生物学特性的影响。方法:从新鲜拔除的健康年轻恒牙中分离培养并鉴定h DPSCs;然后将细胞分为4组,分别用含0、0.1、1.0、10.0μmol/L的MTX进行培养,检测不同浓度MTX对h DPSCs的集落形成、增殖(CCK-8法)、迁移(划痕法)、成骨分化能力(茜素红染色及Western blot实验)以及细胞周期(流式细胞术分析)影响。结果:随着MTX浓度增加,h DPSCs的细胞集落形成能力及迁移速度逐渐降低,呈浓度依赖性;1.0、10.0μmol/L组较0.1μmol/L组对细胞增殖的抑制更显著(P<0.05),但1.0、10.0μmol/L组间相比无统计学差异(P>0.05);细胞周期分析显示,加入MTX后细胞被阻滞于S期,S相细胞从35.4%增加到60.3%64.5%(P<0.05),但3个实验组S相细胞百分数相比P>0.05;茜红素染色显示,1.0、10.0μmol/L组明显抑制矿化结节的形成;Western blot结果显示,各组间RUNX2、OSX、ALP的表达水平相比P>0.05。结论:MTX对h DPSCs的各项生物学特性均会产生不利作用,但影响程度会受药物浓度、作用时间的影响。

• 单位
  中心实验室; 南通大学附属医院