人源抗人类免疫缺陷病毒1型基因工程抗体的初步研究

作者：许四宏; 杜润蕾; 王素婷; 宋爱京; 李秀华; 梁米芳; 王佑春

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2010, (11): 1057-1062.

• HIV-1
• 基因工程抗体
• 噬菌体展示
• 链置换
• 中和试验 HIV-1
• Human genetical antibody
• Phage display
• Strand shift
• Neutralization assay

目的构建噬菌体抗体库,筛选抗HIV-1抗体Fab,并对其进行鉴定。方法采集无症状、HIV-1抗体滴度较高的HIV-1感染者全血,分离淋巴细胞并提取总RNA,经RT-PCR扩增人轻链基因和重链Fd基因。运用噬菌体展示技术,构建噬菌体抗体库,经过3轮"吸附-洗脱-富集"筛选,将获得的克隆进行诱导表达,表达产物经ELISA检测,筛选阳性抗HIV-1 Fab克隆;对获得的克隆进行抗体基因序列测定并分析序列同源性和互补决定区(CDRs);对获得的阳性克隆与轻链克隆CL8进行链置换并检测链置换前后抗体亲和力的变化;对获得的克隆进行诱导表达及纯化,同时进行中和试验。结果构建了库容为8×10~6的噬菌体抗体库...

• 单位
  中国药品生物制品检定所; 中国疾病预防控制中心