大泷六线鱼精巢支持细胞分离培养体系的建立和优化

作者：王旭亮; 彭美婷; 赵茜; 牛晶晶; 齐洁^*

来源：中国海洋大学学报(自然科学版), 2022, 52(07): 72-78.

DOI：10.16441/j.cnki.hdxb.20210216

• 大泷六线鱼
• 支持细胞
• 分离
• 原代培养
• 培养条件

为了建立大泷六线鱼(Hexagrammos otakii)精巢支持细胞系，本研究通过对大泷六线鱼精巢支持细胞进行分离和培养，建立并优化了精巢支持细胞培养体系。首先，在精巢支持细胞分离方法上，相较于组织块培养法，利用酶解法分离获取的支持细胞纯度更高；其次，优化了精巢支持细胞的培养体系，即添加0.1 mmol/L非必需氨基酸或1%鱼胚胎提取液的L-15培养基(含10%胎牛血清(FBS))为最佳培养基；最后对分离和培养的精巢支持细胞进行了鉴定，结果显示贴壁培养的支持细胞呈多边形，碱性磷酸酶(AP)染色呈阴性，支持细胞标记基因wt1表达水平显著高于生殖细胞的标记基因plzf、vasa,确定了所培养的细胞为精巢支持细胞。

• 单位
  中国海洋大学; 生命学院