DHP及其核受体诱导斑马鱼IFI44表达及细胞定位研究

作者：王翠丽

来源：黑龙江畜牧兽医, 2019, (11): 154-184.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.06.0040

• 斑马鱼
• 孕酮核受体
• 17α,20β双羟孕酮
• 干扰素诱导蛋白44
• 细胞定位

为了明确17α,20β双羟孕酮(DHP)及其核受体调控干扰素诱导蛋白44(IFI44)mRNA在雄性斑马鱼组织中的表达机制及细胞定位,试验采用荧光定量PCR法测定IFI44 mRNA组织分布及相对表达量,采用活体和离体E2与DHP暴露方法明确雌二醇(E2)单独暴露及与DHP联合暴露对斑马鱼IFI 44 mRNA相对表达量,采用原位杂交方法明确IFI 44在精巢面积中的定位。结果表明:IFI44 mRNA呈组织差异性分布,脑、心脏、肌肉和肝脏中表达量较少,脾脏和精巢中表达量丰富,差异显著(P<0.05);活体10 nmol/L E2暴露野生型雄性斑马鱼21 d,取精巢组织离体100 nmol/L DHP暴露24 h,E2+DHP处理组精巢组织IFI44 mRNA表达量显著高于单独E2处理组(P<0.05);活体10 nmol/L E2暴露野生型和孕酮核受体敲除型雄性斑马鱼各21 d,取精巢组织离体100 nmol/L DHP暴露24 h,孕酮核受体敲除型雄性斑马鱼E2+DHP处理组IFI44 mRNA的表达量显著低于野生型雄性斑马鱼E2+DHP处理组(P<0.05),但显著高于两种类型雄性鱼单独E2处理组(P<0.05);IFI44原位杂交试验显示基因主要表达于精巢组织支持细胞中。说明DHP及其核受体诱导表达的IFI44极大可能参与了斑马鱼精子发育过程。

• 单位
  生命科学学院; 北部湾环境演变与资源利用教育部重点实验室; 南宁师范大学