碱性蛋白酶交联聚集体的制备及其催化性能研究

作者：区晓阳; 曾英杰; 彭飞; 倪子富; 熊隽; 宗敏华; 娄文勇^*

来源：食品科学技术学报, 2019, 37(03): 33-40.

• 碱性蛋白酶
• 无载体固定化
• 交联酶聚集体
• 酶学性质
• 重复使用稳定性

碱性蛋白酶在食品、医药、酿造、丝绸、皮革等行业中发挥着重要作用。制备了碱性蛋白酶交联体,并对其催化性能进行研究。在最佳制备条件下(90%叔丁醇作为沉淀剂,沉淀时间为15min,交联剂浓度为33 mmol/L,交联时间为6 h),交联酶的酶活回收率为22. 6%。与游离酶相比,交联酶的最适pH值向碱性方向变化,由7. 5变为8. 0,最适温度由60℃变成65℃。酶动力学研究表明,交联酶对酪蛋白的催化水解能力(4. 3 min-1)比游离酶(3. 7 min-1)更高。尽管交联酶最大反应速度Vmax(9. 8 mg/(m L·min))低于游离酶(13. 3 mg/(m L·min)),但交联酶对底物的亲和力Km(2. 3 mg/m L)比游离酶(3. 6 mg/m L)有所增加,而且其热稳定性和酸碱稳定性都得到一定程度的提高。另外,在磷酸盐缓冲液中重复使用5和8批次后,交联酶还能保持82. 5%和56. 5%的酶活性。

• 单位
  华南协同创新研究院; 华南理工大学