miR-378a-3p靶向PKM2基因对食管鳞癌细胞Eca-109凋亡及能量代谢的影响

作者：阿依提拉·热合麦提江; 屈园; 帕力旦·艾孜提; 张法煌; 朱世茂; 胡慧玲; 李卉^*

来源：山西医科大学学报, 2020, 51(04): 283-287.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2020.04.002

• 食管鳞癌
• miR-378a-3p
• 有氧酵解
• PKM2

目的探讨微小RNA-378a-3p(miR-378a-3p)与PKM2基因的关系,以及miR-378a-3p对食管鳞癌细胞Eca-109凋亡及能量代谢的影响。方法采用Eca-109细胞系,后续实验分为空白对照组、阴性对照组(转染negative control)和实验组(miR-378a-3p基因转染24 h与48 h)。利用流式细胞技术检测miR-378a-3p转染后24 h和48 h对Eca-109细胞凋亡的影响;用紫外分光光度法检测miR-378a-3p转染后24 h和48 h对Eca-109细胞能量代谢的影响;用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测miR-378a-3p干预后PKM2蛋白水平的变化。结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组miR-378a-3p转染24 h和48 h时PKM2蛋白的表达水平降低(P <0.05),且48 h较24 h时PKM2蛋白的表达水平降低更明显。与空白对照组和阴性对照组相比,实验组转染miR-378a-3p后24 h和48 h,紫外分光光度法检测ATP含量明显降低(P <0.01),代谢减少,且48 h较24 h的ATP产量降低更明显。与空白对照组和阴性对照组相比,实验组miR-378a-3p转染后24 h和48 h Eca-109细胞的凋亡率显著增高(P <0.001),48 h较24 h时细胞凋亡率增高更明显。结论 miR-378a-3p通过抑制有氧酵解关键酶PKM2来干预食管癌细胞的能量代谢,进而增加细胞的凋亡。

• 单位
  中心实验室; 新疆医科大学; 生物化学教研室; 公共卫生学院; 基础医学院