摘要
为了构建基因Ⅰ/Ⅴ型日本脑炎嵌合病毒并对其生物学特性和致病性进行研究,本研究通过反向遗传技术,以GⅠ型JEV SD12-F120株为骨架获得了含有GⅤ型JEV XZ0934株结构蛋白的嵌合病毒,进一步通过间接免疫荧光、生长曲线、蚀斑和动物试验对其生物学特征和致病性进行了鉴定。结果显示,通过间接免疫荧光试验可鉴定嵌合病毒成功拯救,与亲本病毒相比,其在BHK-21细胞上的复制效率具有显著差异,而蚀斑大小显著大于亲本病毒(P<0.001)。采用脑内和腹腔注射小鼠测得嵌合病毒的半数致死量(LD50)分别为 10-2.2 PFU和10-1.5 PFU,表明该嵌合病毒具有强神经毒力和神经侵袭力,为后续GⅤ型JEV的疫苗和致病机制的研究奠定了基础。
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