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摘要
目的 探究泌尿系疾病患者尿液样本中游离核酸（cf DNA）的质量以及不同原理检测方法的选择。方法 采用试剂盒提取尿液上清中的cfDNA，使用Nanodrop One、Qubit 4、4200 TapeStation及PCR对样本进行检测，查看其纯度、浓度及片段大小。结果 467例尿液cf DNA样本浓度的中位数为16.70 ng/μl，最大值1710ng/μl。仅有50%的样本纯度较高，A260/A280值在1.70～2.00之间，对于纯度较高的样本，不同仪器测得的浓度值比较接近。尿液cf DNA片段大小主要是180bp左右且经常可见约180 bp整数倍的梯度条带，大分子量核酸片段分布在1.5kb及8kb左右。以游离核酸为模板，可扩增出不同大小的β球蛋白基因片段。结论 不同来源的尿液上清中cfDNA浓度差异较大，大分子量核酸片段出现的频率较多，尿液中盐类等杂质可能导致cfDNA样本纯度偏低。采用分光光度法测量尿液cfDNA浓度易出现偏差，而荧光计或生物分析仪可测得较准确浓度值。
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单位武汉大学中南医院
