产(R)-1,3-丁二醇的工程菌构建及转化条件研究

作者：李冉; 宋聪; 张翔; 宋水山; 巩建英; 贾振华^*

来源：生物技术, 2020, 30(02): 116-128.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.02.0020

• 羰基还原酶
• (R)-1,3-丁二醇
• 4-羟基-2-丁酮
• 生物转化

[目的]利用重组大肠杆菌实现(R)-1,3-丁二醇的生物合成。[方法]从脱硫球菌(Desulfococcus biacutus)中克隆得到羰基还原酶基因DbCR,构建pET28a-DbCR表达载体并在大肠杆菌E.coli BL21中表达,利用气相色谱对反应液进行检测。[结果]DbCR在pH 7.5、35℃的最适条件下的酶活力为4.5 U/mL。在50 mL全细胞反应体系中,重组工程菌在pH 7.5、30℃条件下,反应48 h时,对300 mmol/L底物4-羟基-2-丁酮的转化率> 96%,产物(R)-1,3-丁二醇的e.e.值> 99%。[结论]构建得到高效催化合成(R)-1,3-丁二醇的工程菌,工程菌对底物的转化率>96%,产物纯度> 99%。

• 单位
  河北省科学院生物研究所