TBK1在急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用：与内质网应激的关系

作者：曾海媚; 聂嘉仪; 温仕宏; 梁桦^*

来源：中华麻醉学杂志, 2022, 42(11).

• 蛋白激酶类
• 急性肾损伤
• 纤维化
• 内质网应激

目的评价TANK结合激酶-1(TBK1)在急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用及其与内质网应激的关系。方法雄性野生型C57BL/6小鼠24只, 8～10周龄, 体重20～25 g。采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(CON组)、急性肾损伤组(AKI组)、对照+TBK1抑制剂组(CON-GSK组)和急性肾损伤+TBK1抑制剂组(AKI-GSK组)。AKI组和AKI-GSK组小鼠腹腔注射叶酸250 mg/kg制备AKI模型, 叶酸注射后第1天开始, AKI组隔天腹腔注射1次1%二甲基亚砜20 ml/kg, AKI-GSK组隔天腹腔注射1次TBK1抑制剂GSK8612 1.5 mg/kg, 共7次。CON组和CON-GSK组隔天分别腹腔注射1次1%二甲基亚砜20 ml/kg或GSK8612 1.5 mg/kg, 共7次。叶酸注射后第14天, 取小鼠眼球血标本检测血清BUN和Cr的浓度;并提取小鼠肾组织, 行天狼星红染色、Masson染色和HE染色观察肾组织病理学结果, 测定肾纤维化面积, 并行肾小管间质损伤评分;采用免疫荧光法检测肾组织纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的表达;采用免疫印迹法检测肾组织磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化真核细胞起始因子2α(p-eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、磷酸化肌醇需求激酶1α(p-IRE1α)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、凋亡调节信号激酶1(ASK1)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-12(caspase-12)和磷酸化c-Jun氨基末端蛋白激酶(p-JNK)的表达。结果与CON组比较, AKI组和AKI-GSK组血清BUN和Cr浓度升高, 肾纤维化面积增大, 肾小管间质损伤评分升高, 肾组织纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、p-IRE1α、TRAF2、ASK1、caspase-12和p-JNK表达上调(P<0.05), CON-GSK组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与AKI组比较, AKI-GSK组血清BUN和Cr浓度降低, 肾纤维化面积减小, 肾小管间质损伤评分降低, 肾组织纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、p-IRE1α、TRAF2、ASK1、caspase-12和p-JNK表达下调(P<0.05)。结论 TBK1参与AKI小鼠肾纤维化的过程, 其机制可能与促进内质网应激有关。

• 单位
  中山大学附属第一医院; 广东医科大学; 第一临床医学院