NLRP3通过上调骨桥蛋白的表达促进瓣膜间质细胞的钙化

作者：徐然; 吕涛; 虞敏; 杨迪成^*

来源：中国分子心脏病学杂志, 2021, 21(01): 3739-3743.

DOI：10.16563/j.cnki.1671-6272.2021.02.015

• 主动脉瓣钙化
• 瓣膜间质细胞
• 炎性小体
• 骨桥蛋白

目的探讨NLRP3上调主动脉瓣膜间质细胞(VICs)的骨桥蛋白(osteopontin, OPN)表达,在钙化性主动脉瓣膜疾病(CAVD发生发展过程中的作用。方法使用免疫组织化学染色对比不同钙化程度区域NLRP3的表达情况。体外培养VICs后,以不同浓度NLRP3(0、50、100、200 ng/ml)干预48 h,使用PCR和蛋白印迹法检测OPN的表达;以NLRP3 100 ng/mL分别干预VICs 48h、72h、96h、120h,使用PCR和蛋白印迹法检测OPN的表达;采用OPN靶向小干扰RNA(OPN siRNA)转染VICs敲低OPN,PCR检测OPN的表达;以NLRP3的最适浓度(100 ng/mL)干预OPN敲低的VICs 120 h,使用茜素红染色观察VICs的钙化情况。结果 NLRP3在严重钙化组织区域高表达。不同浓度NLRP3干预VICs均可使OPN表达增加,以100 ng/ml浓度效果最佳。且相同浓度NLRP3干预VICs增加OPN的表达呈时间依赖性。OPN siRNA组与对照组比较可有效敲低OPN的表达。与对照组比较,NLRP3+OPN siRNA组VICs的钙化程度明显减少。结论 NLRP3可刺激VICs表达OPN,从而促进VICs钙化并参与CAVD的发生发展。

• 单位
  上海交通大学