牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白原核表达纯化及多克隆抗体的制备

作者：周子恒; 张哲; 肖盛中; 蔡卓轩; 李岩; 张彦红; 杨艳; 陈创夫; 盛金良^*

来源：动物医学进展, 2020, 41(10): 21-25.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.10.004

• 牛病毒性腹泻病毒
• NS3蛋白
• 表达纯化
• 多克隆抗体

原核表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3蛋白,并以此免疫动物制备多克隆抗体。对BVDV NS3蛋白的抗原决定簇氨基酸序列分析,构建重组质粒pET30a-NS3,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,使用IPTG诱导目的蛋白表达。选择最优诱导条件对目的蛋白进行亲和纯化,目的蛋白主要以包涵体形式表达,从而获得NS3蛋白。使用NS3蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗NS3蛋白多克隆抗体,采用ELISA方法检测多克隆抗体效价。结果显示,成功表达并纯化出BVDV NS3蛋白,制备的兔抗NS3蛋白多克隆抗体效价大于1∶128 000,为建立BVDV抗体/抗原检测方法及疫苗的研究奠定了基础。

• 单位
  动物科技学院; 石河子大学