促红细胞生成素基因修饰对H2O2诱导的小鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响

作者：林海泓; 罗心平; 施海明; 龚辉; 史益军

来源：中国分子心脏病学杂志, 2015, 15(03): 1350-1353.

DOI：10.16563/j.cnki.1671-6272.2015.03.001

• 促红细胞生成素
• 转染
• 间充质干细胞
• 凋亡
• 信号途径

目的观察EPO基因修饰对H2O2诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡及相关细胞信号传导通路的影响。方法体外培养小鼠MSCs,制作慢病毒载体并转染EPO基因至第6代MSCs,进行细胞鉴定,ELISA法测定细胞上清液中EPO浓度,Western blot方法检测基因修饰前后PI3K/Akt及NF-κB通路蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡情况。结果成功地制作慢病毒载体,并将EPO基因转染至小鼠MSCs,转染前后细胞表面标志未发生明显变化,转染后细胞上清液中EPO浓度显著升高(P<0.01)。基因修饰可使小鼠MSCs的PI3K/Akt磷酸化水平及总的NF-κB水平升高,但对MSCs的NF-κB磷酸化水平和总的Akt水平无明显影响。转染组凋亡细胞所占百分率低于对照组(P<0.01)。结论 EPO基因修饰后提高了MSCs的分泌EPO能力,并且具有抑制H2O2诱导的MSCs凋亡的作用。其抗凋亡作用可能与PI3K/Akt及NF-κB信号通路有关。

• 单位
  复旦大学附属华山医院; 复旦大学附属金山医院