基于NOS信号的艳山姜挥发油对ox-LDL诱导HAECs损伤的保护作用

作者：徐旖旎; 杨红; 李晨; 令狐克刚; 文波; 沈祥春; 张彦燕

来源：中国实验方剂学杂志, 2017, 23(15): 143-147.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.2017150143

• 艳山姜挥发油
• 氧化低密度脂蛋白
• 人主动脉内皮细胞
• 一氧化氮合酶
• 一氧化氮

目的:研究艳山姜挥发油(EOFAZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用。方法:体外传代培养HAECs,EOFAZ保护作用研究分为7组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L-1oxLDL),EOFAZ高质量浓度组(200 mg·L-1ox-LDL+100μg·L-1EOFAZ),EOFAZ低质量浓度组(200 mg·L-1ox-LDL+10μg·L-1EOFAZ),阿司匹林组(Asp,200 mg·L-1ox-LDL+2.5×10-4mol·L-1Asp),卡维地洛组(Car,200 mg·L-1ox-LDL+1×10-6mol·L-1Car),阿托伐他汀钙组(Atorv,200 mg·L-1ox-LDL+1×10-6mol·L-1Atorv);一氧化氮合酶(NOS)信号研究分为5组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L-1ox-LDL),EOFAZ组(200 mg·L-1ox-LDL+100μg·L-1EOFAZ),NOS抑制剂组(200 mg·L-1ox-LDL+100μmol·L-1L-NAME或300μmol·L-1L-NMMA),EOFAZ加NOS抑制剂组(200 mg·L-1ox-LDL+100μg·L-1EOFAZ+100μmol·L-1L-NAME或300μmol·L-1L-NMMA)。噻唑蓝(MTT)法分析细胞存活率,酶标仪法及Griess试剂法分别检测培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)含量。化学法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测iNOS及eNOS mRNA表达水平。结果:与模型组比较,EOFAZ明显提高ox-LDL诱导损伤的HAECs的细胞存活率,抑制LDH外漏及iNOS活力(P<0.05,P<0.01),促进NO及eNOS的产生(P<0.05,P<0.01)。Real-time PCR分析表明,EOFAZ以及相关抑制剂显著下调iNOS mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01),上调eNOS mRNA表达水平(P<0.05)。结论:EOFAZ对ox-LDL诱导损伤的HAECs具有保护作用,其作用机制与调控eNOS和iNOS的表达水平有关。

• 单位
  贵州医科大学