抗西尼罗病毒抗体类药物的体外筛选

作者:卢星; 张敏; 孙莹; 陈国江; 王晶; 乔春霞; 罗龙龙; 沈倍奋; 冯健男*; 肖鹤*
来源:国际药学研究杂志, 2020, 47(07): 529-533.
DOI:10.13220/j.cnki.jipr.2020.07.007

摘要

目的利用建立的西尼罗假病毒报告系统,体外筛选获得抗西尼罗病毒抗体。方法首先,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测由噬菌体展示技术筛选获得的13株抗西尼罗病毒候选抗体与靶蛋白-西尼罗病毒E蛋白结构域Ⅲ(DⅢ)的结合;其次,将收集的含有西尼罗假病毒的细胞培养上清稀释102倍,分别与相应浓度的候选抗体室温孵育1 h后,将假病毒上清+抗体混合液感染BHK21或者K562细胞,48 h后,裂解细胞测荧光素酶活性(RLU)。结果 13株候选抗体均能识别并结合西尼罗病毒E蛋白DⅢ;其中2株抗体(抗体5和7)具有较好的中和活性,低浓度下(5 mg/L)即能有效阻断病毒入侵靶细胞;而2株抗体(抗体3和8)具有抗体增强效应(ADE),表现为靶细胞病毒感染增强。结论利用建立的西尼罗假病毒报告系统,体外筛选获得2株具有中和活性的抗西尼罗病毒抗体。