阿魏酸通过Sirt1/NLRP3通路抑制电离辐射引起的人小肠上皮细胞炎症

作者:张雪梅; 胡昌坤; 刘桂芳; 谢光辉; 梅雨; 张慧婷; 高月; 马增春
来源:中国药理学与毒理学杂志, 2022, 36(07): 488-494.
DOI:10.3867/j.issn.1000-3002.2022.07.002

摘要

目的 研究阿魏酸对电离辐射诱导的人小肠上皮细胞 HIEC6 炎症的抑制作用及其机制。方法(1) 分别用60Co γ 射线 4,6,8,10 和 14 Gy 单次照射 HIEC6 细胞,24 h 后 CCK-8 法检测细胞存活率,荧光探针 DCFH-DA法检测细胞内活性氧水平。(2) 设细胞对照组、照射组、照射+阿魏酸0.01,0.10和1.00 μmol·L-1组,各组培养 12 h 后,照射+阿魏酸组加入阿魏酸;继续培养 12 h 后,照射和照射+阿魏酸组以60Co γ 射线10 Gy 单次照射。照射后 24 h,ELISA 检测细胞上清中白细胞介素 1β(IL-1β)含量,免疫荧光法检测细胞Nod 样受体家族蛋白 3(NLRP3)蛋白表达水平,实时定量 PCR 和 Western 印迹法检测沉默信息调节因子 1(Sirt1)、NLRP3、胱天蛋白酶 1、活化胱天蛋白酶1及IL-1β mRNA和蛋白表达水平。结果 (1) 与细胞对照组比较,60Co γ射线4,6,8,10和14 Gy照射后24 h,细胞存活率明显降低(P-1组细胞上清中 IL-1β 含量显著减少(P<0.01),NLRP3 蛋白表达明显降低(P<0.01),Sirt1mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),NLRP3、活化胱天蛋白酶 1和 IL-1β mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论 阿魏酸可能通过激活 Sirt1抑制 NLRP3炎症小体表达,从而减轻电离辐射诱导的小肠上皮细胞HIEC6的炎症反应。

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