缺氧微环境下仙连解毒方通过调控HIF-1α影响结直肠癌细胞迁移的作用及机制研究

作者：姜瑞阳; 徐长亮; 程海波^*; 沈卫星; 余成涛; 谭佳妮; 范旻旻

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2022, 24(12): 4650-4658.

DOI：10.11842/wst.20210908010

• 仙连解毒方
• 缺氧微环境
• 结直肠癌
• 细胞迁移
• HIF-1α

目的 通过体外实验研究缺氧微环境下仙连解毒方(Xian-Lian-Jie-Du-Formula,XLJDF)抑制结直肠癌细胞迁移的有效性及其潜在机制。方法 厌氧细胞培养箱(95%N2、5%CO2,O2浓度<1%)中培养人结直肠癌细胞HCT-116,MTT比色法检测XLJDF对细胞活力的影响；伤口愈合实验和细胞迁移实验(Transwell法)检测XLJDF对细胞迁移能力的作用；取对数生长期的细胞分组进行转染和慢病毒感染，RTPCR检测HCT-116细胞中HIF-1α mRNA的表达；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HCT-116细胞中HIF-1α、EMT相关蛋白的表达情况及XLJDF对TGF-β/smad信号通路的调控作用。结果 缺氧条件下，XLJDF能抑制HCT-116细胞活性(P<0.05或P<0.01)。细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验示，XLJDF干预后，与空白对照组相比，细胞迁移速率显著降低(P<0.05或P<0.01)，传入下室的细胞数目显著减少(P<0.05或P<0.01)；与空载体组对比，XLJDF能降低HIF-1α过表达细胞株的细胞迁移速率(P<0.05或P<0.01)和减少传入Transwell下室的细胞数(P<0.05或P<0.01)。Western blot法检测EMT、TGF-β/Smad通路相关蛋白表达，与常氧组相比，缺氧条件下细胞内HIF-1α蛋白表达水平显著升高，且在24 h内呈时间依赖性；XLJDF各浓度干预组，E-钙粘蛋白(E-cadherin)的表达水平显著上升，N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、TGF-β1、p-Smad3的表达量均降低(P<0.05或P<0.01)。结论 缺氧微环境下仙连解毒方能减弱结直肠癌细胞HCT-116迁移能力，调控HIF-1α介导的TGF-β/smad信号通路激活、逆转EMT可能是其潜在机制之一。

• 单位
  第一临床医学院; 南京中医药大学