摘要
目的 探讨穿心莲内酯(Andro)激活肝激酶B1(LKB1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路对视网膜母细胞瘤(RB)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 体外培养人RB细胞株Y79细胞,不同浓度Andro处理后,首先采用MTT法测定细胞活力,并计算其半数抑制浓度IC50。然后,将Y79细胞分成空白对照组(Control组)、溶剂对照组(DMSO组)、Andro低剂量组(7.5μmol/L)、中剂量组(15μmol/L)、高剂量组(30μmol/L)和Andro高剂量+LKB1抑制剂(radicicol)组(30μmol/L Andro+0.05μmol/L radicicol),分别采用克隆形成实验评价细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验评估细胞迁移能力,Western blot检测LKB1/AMPK信号通路相关蛋白的表达。结果 Andro对Y79细胞的IC50为15μmol/L;与Control组和DMSO组相比,Andro低、中、高剂量组Y79细胞克隆形成率和相对迁移距离降低,细胞凋亡率增高,LKB1和AMPK蛋白磷酸化水平升高,p70核糖体S6激酶(p70S6K)和S6蛋白磷酸化水平降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与Andro高剂量组相比,Andro高剂量+radicicol组LKB1、AMPK蛋白磷酸化水平降低,p70S6K和S6蛋白磷酸化水平升高,克隆形成率和相对迁移距离增高,凋亡率降低(P<0.05)。结论 Andro可能通过激活LKB1/AMPK信号通路从而发挥抑制RB细胞增殖、迁移,并诱导其凋亡的作用。
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