绵羊FecB基因高通量HRM检测方法的建立及准确性评价

作者：张立春; 李梦姝; 王伟霞^*; 李信涛; 佟桂芝; 海龙; 潘志忠^*

来源：中国畜牧杂志, 2023, 59(10): 331-336.

DOI：10.19556/j.0258-7033.20211013-03

• 绵羊
• FecB基因
• 高分辨率溶解曲线法
• 基因组PCR
• 测序

为了建立绵羊FecB基因高通量检测HRM方法并对其准确性进行检验，实验首先采用基因组PCR产物直接测序法，分别筛选出BB、B+和++基因型基因组各2份，参照HRM原理分别设计检验引物H1和H2并进行系统检验分析。分析结果发现，使用H1引物扩增效率及特异性良好，但不能分辨BB基因型，而使用H2引物扩增效率及特异性良好，且能够有效识别3种基因型。扩大检验群体发现，使用H2引物的HRM技术重复性良好。以基因组PCR产物直接测序结果为参考标准，检验HRM方法的准确性发现BB基因型检验敏感度为75%,B+和++基因型敏感性分别为96.2%和100%，总体准确率为96.9%，证实该方法能够满足育种实践对检测技术准确性的要求。绵羊FecB基因HRM检验方法的建立为高繁殖性状肉羊育种提供了新的技术工具。

• 单位
  黑龙江省农业科学院; 松原职业技术学院; 吉林省农业科学院