海马ERK1/2在外源性CO改善失血性休克复苏大鼠认知功能中的作用

作者：孙文波; 张立民^*; 张冬雪; 李睿

来源：中华麻醉学杂志, 2018, 38(12).

• 细胞外信号调节MAP激酶类
• 一氧化碳
• 再灌注损伤
• 海马
• 细胞凋亡
• 认知障碍

目的评价海马细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)在外源性一氧化碳(CO)改善失血性休克复苏大鼠认知功能中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠90只,9～10周龄,体重350～400 g,采用随机数字表法分为5组(n=18):假手术组(S组)、失血性休克复苏组(H组)、CO组(CO组)、PD98059-CO组(PCO组)和PD98059组(P组)。失血性休克通过股静脉放血至MAP为25～35mmHg维持60 min,将收集的血液在15 min内回输体内达到初始血压水平作为复苏,必要时输注生理盐水,建立失血性休克复苏模型;CO组复苏结束后立即将大鼠置于含有1%CO混合空气的玻璃箱内3 h;PCO组和PC组放血前30 min时脑室内注射ERK1/2抑制剂PD98059(30μmol/L)30μl;S组只进行股静脉、股动脉穿刺置管和脑室内注射生理盐水。于复苏结束后3 h时处死大鼠取海马,采用气相分析法测定海马CO含量;于复苏结束后第15天时采用Morris水迷宫实验评价认知功能,随后处死取海马,TUNEL联合活化caspase-3免疫荧光法测定海马CA1区细胞凋亡率;于复苏结束后6 h时处死大鼠取海马,采用Western blot法检测磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、Bcl-2和Bax表达。结果与S组比较,H组、PCO组和P组逃避潜伏期延长,H组、CO组、PCO组和P组海马CO含量增加,神经细胞凋亡率升高,活化caspase-3和p-ERK1/2表达上调,Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05);与H组比较,CO组逃避潜伏期缩短,海马CO含量增加,神经细胞凋亡率降低,活化caspase-3表达下调,pERK1/2表达上调,Bcl-2/Bax比值升高,P组逃避潜伏期延长,海马CO含量减少,神经细胞凋亡率升高,活化caspase-3表达上调,p-ERK1/2表达下调,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05);与CO组比较,PCO组逃避潜伏期延长,神经细胞凋亡率升高,活化caspase-3表达上调,p-ERK1/2表达下调,Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05)。结论外源性CO改善失血性休克复苏大鼠的认知功能,与增加海马神经细胞ERK1/2磷酸化水平,抑制神经细胞凋亡有关。

• 单位
  沧州市中心医院