Hippo信号通路在结核分枝杆菌感染A549细胞中的免疫调控作用分析

作者：金武^*; 宋斌; 程海林

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(22): 3647-3652.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.22.018

• 肺泡Ⅱ型上皮细胞
• 结核分枝杆菌
• Hippo信号通路
• 免疫调控
• 细胞凋亡

目的研究Hippo信号通路对结核分枝杆菌(BCG)感染肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)A549的免疫调控机制。方法体外培养A549细胞,随机分为对照组、MST1/2抑制剂(XMU-MP-1)组、BCG组、XMU-MP-1+BCG组。用含有5μmol·L-1XMU-MP-1抑制剂的培养液培养XMU-MP-1组和XMU-MP-1+BCG组细胞,并用BCG感染BCG组和XMU-MP-1+BCG组,对照组正常培养。以MTT实验检测细胞增殖率,以蛋白质印迹(WB)法分析Hippo信号通路核心蛋白哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、p-Mst1、lats1、p-lats1蛋白表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞IL-8、IL-12A、TNF-αmRNA表达;透射电镜、流式细胞术观察细胞凋亡情况;以蛋白质印迹(WB)法检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved-caspase3、Yes相关蛋白(YAP)、PDZ结合域的转录共刺激因子(TAZ)蛋白表达。结果对照组、BCG组、XMU-MP-1组和XMU-MP-1+BCG组的p-Mst1蛋白分别为0.52±0.07,1.03±0.23,0.22±0.04,0.48±0.06;p-lats1蛋白表达分别为0.51±0.06,0.82±0.05,0.26±0.02,0.43±0.08,IL-8 mRNA分别为1.03±0.08,1.84±0.15,0.69±0.23,0.89±0.12,IL-12A mRNA分别为1.04±0.05,1.73±0.29,0.67±0.14,0.85±0.06,TNF-αmRNA分别为1.02±0.07,1.68±0.25,0.39±0.18,0.78±0.09,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论抑制Hippo信号通路能够提高A549抗BCG感染的能力,其可能通过调控下游YAP/TAZ蛋白实现。

• 单位
  武汉市肺科医院