摘要
目的以前期筛选出的核酸适配子GC-1为靶向分子,量子点作为标志物,观察其对胃癌细胞的特异性识别。方法分别以培养的低转移胃癌细胞SGC-7901、高侵袭转移性胃癌细胞OCUM-2 MD3为研究对象,检测GC-1的识别能力,并采用流式和共聚焦方法初步分析适配子GC-1在细胞上的靶向结合位点。以临床确诊的30例胃癌组织切片为研究对象,采用间接荧光法分析适配子GC-1的鉴别诊断能力,并根据GC-1的阳性率进一步分析患者生存曲线。把不同数量(105、104、103、102个)的胃癌细胞OCUM-2 MD3分别混匀到1 ml健康人外周血中,NH4 Cl裂解法去除红细胞,然后与CY3标记的核酸适配子GC-1孵育,采用流式细胞仪分析。结果核酸适配子GC-1耦联量子点的功能化分子探针可识别体外培养的胃癌细胞,也可识别临床胃癌患者组织切片中的癌细胞;在30例确诊的胃癌组织切片中,该功能化分子探针可识别出其中8例,该8例阳性患者与其余22例阴性患者的生存曲线分析差异有统计学意义(P<0.01)。流式分析法显示:即使102个胃癌细胞混到1 ml健康人的外周血中,CY3标记的适配子GC-1也可识别少量的外周血模拟环境中的胃癌细胞。结论基于适配子-量子点的功能化生物分子探针可检测临床组织切片;适配子能特异识别外周血胃癌细胞,可作为捕获循环胃癌细胞的潜在分子。
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单位武汉大学中南医院; 通山县人民医院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院