科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 探讨二代测序（NGS）技术在常染色体隐性遗传性多囊肾病（ARPKD）家系胚胎植入前遗传学检测（PGT）中的应用价值。方法 选取1个ARPKD家系，采用Sanger测序调查家系成员多囊肾/多囊肝病变1(PKHD1)基因突变情况。以PKHD1基因编码区为目标区域，在基因上下游2 M区域内选择120个高密度紧密连锁的单核苷酸多态性（SNP）位点作为遗传连锁标记，采用多重聚合酶链反应（PCR）和NGS选择有效SNP位点构建家系成员的SNP单倍型，确定夫妇双方携带基因突变的风险染色体。对活检获得的滋养层细胞进行全基因组扩增，采用NGS对胚胎的PKHD1基因突变位点进行直接测序，构建胚胎SNP单倍型进行连锁分析。采用Sanger测序验证胚胎PKHD1基因突变位点NGS结果。对正常和携带杂合突变的胚胎进行低深度的染色体非整倍性筛查。结果 家系成员中，父亲携带PKHD1基因c.5935G>A，为杂合子；母亲携带PKHD1基因c.10058T>G，为杂合子；先证者携带PKHD1基因c.5935G>A和c.10058T>G双重杂合突变。用于活检的5个胚胎中有2个未检测到突变，有3个携带杂合突变。低深度的染色体非整倍性筛查显示5个胚胎中3个为整倍体，2个为非整倍体。选择未检测到突变且发育良好的整倍体胚胎植入母体子宫后，足月分娩一健康婴儿。结论 应用NGS对ARPKD家系进行PGT，可阻断此单基因病在该家系中的再发风险，同时还可避免选择非整倍体胚胎而导致的流产问题。
- 单位
