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摘要
目的：观察半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中多形核髓系来源抑制细胞(PMN-MDSCs)凋亡的影响。方法：制备半夏泻心汤含药肠吸收液，以Transwell小室将胃癌细胞与PMN-MDSCs非接触共培养建立胃癌微环境模型，采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法筛选0.63 g·m L-1复溶液制备而成的0～100%半夏泻心汤含药肠吸收液的最佳干预浓度及时间，分为空白组、模型组、奥沙利铂组(10 mg·L-1)及半夏泻心汤组(26%、18%、10%含药肠吸收液)，采用CCK-8法检测PMN-MDSCs的增殖，流式细胞术检测PMN-MDSCs的凋亡，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PMN-MDSCs胃癌微环境凋亡相关蛋白，B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果：作用24、48 h，与空白组比较，5%、50%、75%、100%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率均有升高((P<0.05,P<0.01)，作用72 h，除50%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率低于48 h(P<0.01)，其余浓度各自抑制率差异无统计学意义，且48 h半数抑制浓度(IC50)为18.40%，说明18%半夏泻心汤含药肠吸收液在48 h为最佳干预浓度及时间。与空白组比较，模型组PMN-MDSCs的存活率明显升高(P<0.05)，凋亡率明显下降(P<0.05)；与模型组比较，半夏泻心汤组PMN-MDSCs存活率均明显降低(P<0.05)，凋亡率明显升高(P<0.05)，以半夏泻心汤组(26%含药肠吸收液)最为明显(P<0.05)。与空白组比较，模型组PMN-MDSCs促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达明显降低(P<0.05)，抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显上升(P<0.05)。与模型组比较，奥沙利铂组、半夏泻心汤组PMN-MDSCs Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05)，奥沙利铂组、半夏泻心汤组(10%含药肠吸收液)Bax蛋白表达升高(P<0.05)。结论：半夏泻心汤含药肠吸收液能通过调控胃癌微环境PMN-MDSCs凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3及Bcl-2的表达，诱导PMN-MDSCs凋亡。
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