摘要
目的探讨乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B e antigen,HBe Ag)对Bewo细胞维甲酸诱导基因-I(retinoic acidinducible-I,RIG-I)和线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)表达的作用。方法首先以终浓度2μg/m L的RIG-I配体poly(d AT∶d AT)处理Bewo细胞24 h,观察RIG-I、MAVS m RNA的表达。然后将5μg HBe Ag重组质粒pc DNA3.1(+)-HBe转染Bewo细胞,转染48 h后,以2μg/m L的poly(d AT∶d AT)刺激24 h。采用实时荧光定量反转录PCR和酶联免疫吸附测定分别检测细胞RIG-I、MAVS m RNA表达及上清干扰素-β(interferon-β,IFN-β)水平。并采用免疫荧光染色法观察HBe Ag对细胞核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65入核的影响。结果 poly(d AT∶d AT)可诱导Bewo细胞RIG-I、MAVS m RNA表达(27.86±9.49,21.75±8.04),高于对照组(14.51±6.27,11.59±4.73)(P<0.01)。转染5μg HBe Ag重组质粒组poly(d AT∶d AT)可诱导Bewo细胞RIG-I、MAVS m RNA表达(13.33±4.23,10.48±3.17)及IFN-β产生[(14.20±5.01)pg/m L],低于对照组[27.86±9.49,21.75±8.04;(47.69±14.3)pg/m L](P<0.01),但与pc DNA3.1-HBe-5组[11.82±3.58,9.39±3.22;(10.82±3.75)pg/m L]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。且HBe Ag可干扰poly(d AT∶d AT)诱导Bewo细胞NF-κB p65入核,抑制NF-κB的激活。结论 HBe Ag可下调Bewo细胞RIG-I、MAVS m RNA的表达,并抑制NF-κB入核及IFN-β产生,这可能是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)逃避宿主免疫应答的一种重要策略。
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