一种制备组蛋白质谱分析样品的新方法

作者：赵志强; 邱辉华; 薛鹏; 陈永峰; 王晓明; 杨福全

来源：生物技术, 2013, (05): 59-63.

• 组蛋白
• 翻译后修饰
• HPLC
• 丙酰化
• 质谱 Histone
• Post-translational modification
• Propionylation
• Mass spectrometry

目的:质谱技术已经广泛应用于分析组蛋白的翻译后修饰。传统的样品制备是将酸提取的组蛋白混合物在溶液中酰基化并胰酶酶解,不但操作过程复杂,而且难以解释鉴定肽段的最终归属,因此有必要对其进行改进。方法:首先对组蛋白纯化试剂盒提取的组蛋白H3/H4组分进行高效液相色谱分离,然后对纯化的的单个H3.1和H4进行胶内丙酰化衍生和胰酶消化,最后将制备的样品进行质谱分析和数据库检索。结果:鉴定到的组蛋白肽段数目至少提高60%且修饰种类和位点都有不同程度的提高。结论:建立了一种简便有效的基于高效液相色谱纯化和胶内丙酰化衍生的制备组蛋白质谱分析样品的新方法。

• 单位
  生物大分子国家重点实验室; 中国科学院生物物理研究所; 台州学院