口蹄疫病毒结构蛋白VP1与细胞间黏附分子ICAM-2重组融合蛋白的表达及免疫原性分析

作者：芦延珍; 刘新生; 周鹏; 方玉珍; 张永光; 刘霞; 王永录; 杜晓华

来源：中国兽医科学, 2017, 47(08): 939-944.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2017.08.001

• 口蹄疫病毒
• 融合蛋白
• 杆状病毒
• 表达
• 免疫原性分析

利用PAS(PCR-based accurate synthesis)方法人工合成融合蛋白基因序列VP1-ICAM-2,通过限制性内切酶Bam HⅠ和HindⅢ将合成的基因序列引入转移载体p Fast-Bac1,从而获得重组质粒pFastBac1-VP1-ICAM-2。然后将其转化至DH10Bac感受态细胞后进行蓝白斑筛选,获得阳性重组杆粒rBacmidVP1-ICAM-2。将阳性重组杆粒转染Sf9细胞获得重组杆状病毒rBac-VP1-ICAM-2。Western-blot检测结果显示,重组蛋白约57 ku,与预期结果相符且能被FMDV A型阳性血清所识别。将亲和层析纯化的融合蛋白接种豚鼠,对其在豚鼠中的免疫原性进行分析;结果,融合蛋白VP1-ICAM-2能诱导豚鼠产生特异性抗口蹄疫病毒的体液免疫应答和细胞免疫应答。上述研究结果为研制新型口蹄疫亚单位疫苗提供了思路。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 生命科学技术学院; 甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所