二甲基甲酰胺致H9c2心肌细胞炎性损伤研究

作者：荣青秀; 杨永坚; 张婉婉; 马晓丽; 向梅; 王璐璐; 孙文静

来源：中国职业医学, 2017, 44(01): 42-54.

• 二甲基甲酰胺
• H9c2心肌细胞
• 炎性损伤
• 活性氧
• 核转录因子-κB

目的探讨二甲基甲酰胺(DMF)对H9c2心肌细胞炎性损伤的影响及其可能的机制。方法取离体培养H9c2心肌细胞,设对照组和50、100、200 mmol/L组,分别予浓度为0、50、100、200 mmol/L DMF处理12 h;设对照组和2、4、6、8、12 h组,分别予浓度为200 mmol/L DMF处理0、2、4、6、8、12 h。以比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力,紫外分光光度法检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活力,酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8水平,荧光探针法检测活性氧水平,免疫荧光细胞化学(IFC)法检测核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白定位。结果与对照组比较,50、100、200 mmol/L组细胞LDH、CK和CK-MB活力均升高(P<0.05),均呈剂量-效应关系(P<0.01);6、8、12 h组细胞LDH、CK和CK-MB活力均升高(P<0.01),呈时间-效应关系(P<0.01)。与对照组比较,200 mmol/L组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平均升高(P<0.05),4和12 h组细胞TNF-α水平均升高(P<0.05),2、4、6、8和12 h组细胞IL-1β水平均升高(P<0.05),2和4 h组细胞IL-6水平均升高(P<0.05),2 h组细胞IL-8水平升高(P<0.05);且TNF-α、IL-1β和IL-6水平在4 h组达到高峰,IL-8水平在2 h组达到高峰。2、4和6 h组细胞内活性氧水平均高于对照组(P<0.05);活性氧水平在2 h组达到高峰。IFC法对细胞内NF-κB p65蛋白定位显示,染毒后2、4 h组细胞核内p65蛋白荧光强度较对照组增强。结论 DMF对H9c2心肌细胞造成炎性损伤,且活性氧和NF-κB可能参与炎性损伤过程。

• 单位
  安徽医科大学; 安徽医科大学第一附属医院; 公共卫生学院