牛卵泡颗粒细胞CART与候选受体的分子对接及其功能

作者：郝琴琴; 任静; 成俊丽; 朱芷葳; 许冬梅; 贾雪纯; 李鹏飞^*

来源：湖南农业大学学报(自然科学版), 2023, 49(04): 461-467.

DOI：10.13331/j.cnki.jhau.2023.04.013

• 牛
• 卵泡颗粒细胞
• CART候选受体
• 分子对接

通过同源建模预测牛卵泡颗粒细胞(GCs)可卡因–苯丙胺转录肽(CART)与候选受体ZMPSTE24的三维结构，运用分子对接技术分析二者的结合模式，探究其分子互作关系；选取3头健康成年母牛，分离GCs，转染TEDDM1、CMKLR1、AGTR2、ZMPSTE24沉默序列，提取总RNA，并采用q RT–PCR检测TEDDM1、AGTR2、CMKLR1、ZMPSTE24等4个候选受体沉默后m RNA的相对表达量；采用CCK–8法测定各试验组和对照组GCs增殖情况；采用ELISA法检测各组培养液中雌激素(E2)的质量浓度，研究此4个候选受体在牛卵泡GCs中的功能。结果表明：ZMPSTE24与CART存在1个结合位点、9个盐桥、17个氢键；4个候选受体试验组的m RNA相对表达量均极显著(P<0.01)低于si NC组和空白组的，表明TEDDM1、CMKLR1、AGTR2、ZMPSTE24在GCs中沉默效果良好；TEDDM1、CMKLR1、AGTR2、ZMPSTE24沉默后，各试验组的细胞增殖率和培养液中E2质量浓度均极显著(P<0.01)低于阳性对照组(不加CART)的。可见，4个候选受体基因沉默后，CART对GCs增殖和E2分泌仍具有抑制作用。

• 单位
  生命科学学院; 山西农业大学