摘要
背景与目的研究表明毒蕈碱胆碱受体3(muscarinic receptor 3,M3R)在多种肿瘤的发生、发展中发挥重要的作用。本研究旨在探讨M3R在人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株SBC3的表达,M3R拮抗剂对细胞增殖、凋亡及粘附的影响。方法体外培养SBC3细胞,RT-PCR和Western blot检测M3R的表达。MTT法及流式细胞法检测M3R拮抗剂(4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine methiodide,4-DAMP)对细胞增殖和凋亡的影响。流式细胞法检测细胞整合素的表达及碘化乙酰胆碱(acetylcholine iodide,Ach)和4-DAMP对整合素表达的影响。纤维结合蛋白(Fn)包被的96孔板用以研究Ach、4-DAMP及整合素抗体对细胞粘附的作用。结果 SBC3细胞表达M3R,4-DAMP浓度依懒性抑制细胞增殖。与对照组比较,10-4 M 4-DAMP能够明显地增加SBC3细胞凋亡。SBC3细胞表达αvβ1和α5β1整合素,10-4 M Ach刺激细胞粘附(P<0.01)的作用几乎被10-5M 4-DAMP、5μg/m L抗-β1抗体或抗-αv和α5抗体完全阻断(P<0.01),但Ach及4-DAMP不影响αv、α5和β1的表达水平。结论 SBC3细胞表达M3R,M3R拮抗剂能抑制细胞的增殖并促进凋亡。其抑制粘附的作用是通过抑制细胞含β1的整合素(αvβ1和α5β1)的功能实现的。
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单位宁夏医科大学总医院; 宁夏医科大学